¿Cómo pueden los viales de fase móvil cumplir con los requisitos de las operaciones analíticas rutinarias?

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La botella de disolvente es el punto de partida para la fase móvil y se utiliza típicamente para contener una solución acuosa o una solución orgánica.

Para soluciones acuosas, la principal preocupación es prevenir la contaminación. Aunque el agua utilizada en cromatografía líquida generalmente se esteriliza, las bacterias son altamente resistentes; bajo condiciones adecuadas de temperatura y luz, se activan, y la adición de aditivos como fosfatos a la fase móvil acelera aún más su crecimiento. Por lo tanto, una tarea crucial con respecto a los viales de disolvente es reemplazar la fase móvil con frecuencia para asegurar que se mantenga fresca.

Con las fases de solución orgánica, no hay necesidad de preocuparse por el crecimiento bacteriano. Sin embargo, las fases orgánicas son propensas a la polimerización; el acetonitrilo, en particular, se polimeriza muy fácilmente en condiciones de luz adecuadas, lo que provoca la formación de precipitados polimerizados floculantes en el frasco. Para evitar la polimerización, use frascos de solvente marrones al almacenar acetonitrilo para evitar la luz solar directa, y deseche cualquier solución residual en el fondo del frasco al reemplazarlo.

El cabezal del filtro en el frasco de solvente sirve para evitar que las impurezas particuladas entren en el sistema de flujo del instrumento. Generalmente está hecho de vidrio de cuarzo sinterizado o acero inoxidable. Si se obstruye, causará un flujo deficiente de la fase móvil; por lo tanto, debe limpiarse. Los cabezales de filtro de vidrio generalmente se sumergen en ácido nítrico diluido, mientras que los de acero inoxidable se pueden limpiar directamente con ultrasonido.

El propósito del desgasificado es eliminar los gases disueltos de la fase móvil, asegurando una entrega precisa del fluido por parte de la bomba cromatográfica y mejorando la reproducibilidad de los tiempos de retención y las áreas de los picos; estabilizando la línea base y aumentando la relación señal-ruido; previniendo el ensanchamiento de picos causado por burbujas, mejorando así el rendimiento del detector; y reduciendo el volumen muerto y previniendo la oxidación del empaque, protegiendo así la columna cromatográfica.

Actualmente, se utilizan comúnmente los siguientes cuatro métodos de desgasificado:

(1) Desgasificación con helio: Este método aprovecha el hecho de que el helio tiene una menor solubilidad en líquidos que el aire; el burbujeo continuo de helio produce buenos resultados, pero es costoso;

(2) Calentamiento y reflujo: Este método es efectivo, pero implica operaciones complejas y presenta un riesgo de contaminación por vapores tóxicos;

(3) Desgasificación al vacío: Este método tiende a eliminar la fase orgánica;

(4) Desgasificación ultrasónica: La fase móvil se coloca en un recipiente ultrasónico y se agita con ondas ultrasónicas durante 10 a 15 minutos; aunque este método es menos efectivo, es simple de operar. En la práctica, el método de desgasificación ultrasónica sigue siendo ampliamente utilizado debido a su simplicidad. Aunque este método puede ocasionalmente provocar un aumento en la solubilidad del gas, generalmente cumple con los requisitos de las operaciones analíticas de rutina.