**اصلی از اینترنت
ظرفیت بارگذاری نمونه یک ستون کروماتوگرافی به طور کلی به ستون آمادهسازی اشاره دارد. چه عواملی بر ظرفیت بارگذاری نمونه یک ستون کروماتوگرافی تأثیر میگذارند؟ چه نتایج متفاوتی ممکن است از ظرفیتهای بارگذاری نمونه متغیر حاصل شود؟
۱. وابسته به پارامترهای پرکننده
① هرچه اندازه منافذ ماده پرکننده بزرگتر باشد، سطح ویژه آن کوچکتر است که منجر به فازهای ساکن پیوندی کمتر، سایتهای جذب کمتری برای نمونه و در نتیجه ظرفیت بارگذاری نمونه پایینتر میشود؛
② هرچه چگالی پیوند بیشتر باشد، سایتهای جذب بیشتری در دسترس است که منجر به ظرفیت بارگذاری نمونه بالاتر میشود؛
③ مواد پرکننده کاملاً متخلخل نسبت به مواد پرکننده هسته-پوسته (زیرا هسته جامد مواد هسته-پوسته بخشی از سطح ویژه را اشغال میکند) ظرفیت بارگذاری نمونه بیشتری از خود نشان میدهند.
نکته: این موضوع مستقیماً به محتوای کربن مربوط نمیشود. به عنوان مثال، C18 محتوای کربن بالاتری نسبت به C8 دارد، اما این صرفاً نشاندهنده زنجیره کربن طولانیتر و آبگریزی بیشتر است. تعداد سایتهای جذب یا چگالی پیوند لزوماً از این قاعده پیروی نمیکند.
برای فازهای پیوندی یکسان - مانند هر دو فاز پیوندی C18 - محتوای کربن بالاتر با چگالی پیوند و ظرفیت بارگذاری نمونه همبستگی مثبت دارد.
2. مربوط به مشخصات ستون
هر چه ابعاد ستون بزرگتر باشد، مقدار بیشتری از مواد بسته بندی نیاز است و ظرفیت بارگذاری نمونه بالاتر می رود.
3. مربوط به انتخاب پذیری ستون کروماتوگرافی و فاز متحرک
۴. مربوط به راندمان ستون
① هرچه اندازه ذرات بسته بندی کوچکتر باشد، راندمان ستون بالاتر، تفکیک بیشتر و ظرفیت بارگذاری نمونه بیشتر است؛
② هرچه طول ستون بیشتر باشد، راندمان ستون بالاتر، تفکیک بیشتر و ظرفیت بارگذاری نمونه بیشتر است.
۵. مربوط به سهولت جداسازی از نمونه
جایی که ناخالصیها تفکیک کم و محتوای بالایی از خود نشان میدهند، با جداسازی ترکیب هدف تداخل کرده و به طور قابل توجهی بر ظرفیت بارگذاری نمونه ستون تأثیر میگذارند.