چگونه ویال‌های فاز متحرک می‌توانند الزامات عملیات تحلیلی معمول را برآورده کنند؟

**نویسنده: برگرفته از اینترنت

بطری حلال نقطه شروع فاز متحرک است و معمولاً برای نگهداری محلول آبی یا محلول آلی استفاده می‌شود.

برای محلول‌های آبی، نگرانی اصلی جلوگیری از آلودگی است. اگرچه آبی که در کروماتوگرافی مایع استفاده می‌شود معمولاً استریل می‌شود، باکتری‌ها بسیار مقاوم هستند؛ در شرایط دمایی و نوری مناسب، فعال می‌شوند و افزودن مواد افزودنی مانند فسفات‌ها به فاز متحرک رشد آن‌ها را بیشتر تسریع می‌کند. بنابراین، یک وظیفه حیاتی در مورد ویال‌های حلال، تعویض مکرر فاز متحرک برای اطمینان از تازه ماندن آن است.

در فازهای آلی، نیازی به نگرانی درباره رشد باکتری نیست. با این حال، فازهای آلی مستعد پلیمریزاسیون هستند؛ به‌ویژه استونیتریل، که در شرایط نوری مناسب بسیار آسان پلیمریزه می‌شود و در نتیجه رسوبات پلیمری پوسته‌پوسته در بطری تشکیل می‌شود. برای جلوگیری از پلیمریزاسیون، هنگام نگهداری استونیتریل از بطری‌های حلال قهوه‌ای استفاده کنید تا از تابش مستقیم نور خورشید جلوگیری شود و هنگام تعویض، هر محلول باقی‌مانده در ته بطری را دور بریزید.

سر فیلتر در بطری حلال برای جلوگیری از ورود ناخالصی‌های ذره‌ای به سیستم جریان دستگاه استفاده می‌شود. این فیلتر معمولاً از شیشه کوارتز زینتر شده یا فولاد ضدزنگ ساخته می‌شود. اگر مسدود شود، باعث جریان ضعیف فاز متحرک می‌شود؛ بنابراین باید تمیز شود. سر فیلترهای شیشه‌ای معمولاً در اسید نیتریک رقیق خیسانده می‌شوند، در حالی که سر فیلترهای فولادی ضدزنگ را می‌توان مستقیماً با اولتراسونیک تمیز کرد.

هدف از گاززدایی حذف گازهای حل‌شده از فاز متحرک است، که تحویل دقیق سیال توسط پمپ کروماتوگرافی را تضمین می‌کند و تکرارپذیری زمان بازداری و مساحت پیک را بهبود می‌بخشد؛ تثبیت خط پایه و افزایش نسبت سیگنال به نویز؛ جلوگیری از پهن‌شدن پیک ناشی از حباب، در نتیجه بهبود عملکرد آشکارساز؛ و کاهش حجم مرده و جلوگیری از اکسیداسیون بستر، بنابراین از ستون کروماتوگرافی محافظت می‌کند.

در حال حاضر، چهار روش گاززدایی زیر معمولاً استفاده می‌شود:

(1) گاززدایی با هلیوم: این روش از این واقعیت استفاده می‌کند که حلالیت هلیوم در مایعات کمتر از هوا است؛ دمش مداوم هلیوم نتایج خوبی به همراه دارد اما پرهزینه است؛

(2) حرارت دادن و بازگرداندن (ریفلاکس): این روش مؤثر است اما شامل عملیات پیچیده است و خطر آلودگی ناشی از بخارات سمی را به همراه دارد؛

(3) گاززدایی با خلأ: این روش تمایل به حذف فاز آلی دارد؛

(4) گاززدایی با اولتراسونیک: فاز متحرک در یک ظرف اولتراسونیک قرار داده می‌شود و با امواج اولتراسونیک به مدت ۱۰ تا ۱۵ دقیقه هم زده می‌شود؛ اگرچه این روش کمتر مؤثر است، اما عملکرد آن ساده است. در عمل، روش گاززدایی با اولتراسونیک به دلیل سادگی آن همچنان به طور گسترده استفاده می‌شود. اگرچه این روش ممکن است گاهی منجر به افزایش حلالیت گاز شود، اما به طور کلی نیازهای عملیات تحلیلی معمول را برآورده می‌کند.