Comment les flacons de phase mobile peuvent-ils répondre aux exigences des opérations analytiques de routine ?

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Le flacon de solvant est le point de départ de la phase mobile et est généralement utilisé pour contenir soit une solution aqueuse, soit une solution organique.

Pour les solutions aqueuses, la préoccupation principale est la prévention de la contamination. Bien que l'eau utilisée en chromatographie liquide soit généralement stérilisée, les bactéries sont très résistantes ; dans des conditions de température et de lumière appropriées, elles deviennent actives, et l'ajout d'additifs tels que des phosphates à la phase mobile accélère encore leur croissance. Par conséquent, une tâche cruciale concernant les flacons de solvant est de remplacer fréquemment la phase mobile pour garantir qu'elle reste fraîche.

Avec les phases organiques, il n'est pas nécessaire de s'inquiéter de la croissance bactérienne. Cependant, les phases organiques sont sujettes à la polymérisation ; l'acétonitrile, en particulier, polymérise très facilement dans des conditions de lumière appropriées, entraînant la formation de précipités polymérisés floconneux dans le flacon. Pour éviter la polymérisation, utilisez des flacons de solvant bruns lors du stockage de l'acétonitrile afin d'éviter la lumière directe du soleil, et jetez toute solution résiduelle au fond du flacon lors de son remplacement.

La tête de filtre dans le flacon de solvant sert à empêcher les impuretés particulaires de pénétrer dans le système de flux de l'instrument. Elle est généralement fabriquée en verre de quartz fritté ou en acier inoxydable. Si elle se bouche, cela entraînera une mauvaise circulation de la phase mobile ; par conséquent, elle doit être nettoyée. Les têtes de filtre en verre sont généralement trempées dans de l'acide nitrique dilué, tandis que celles en acier inoxydable peuvent être nettoyées directement par ultrasons.

Le but du dégazage est d'éliminer les gaz dissous de la phase mobile, garantissant une distribution précise du fluide par la pompe chromatographique et améliorant la reproductibilité des temps de rétention et des aires de pics ; stabilisant la ligne de base et augmentant le rapport signal/bruit ; empêchant l'élargissement des pics dû aux bulles, améliorant ainsi les performances du détecteur ; et réduisant le volume mort et prévenant l'oxydation du garnissage, protégeant ainsi la colonne chromatographique.

Actuellement, les quatre méthodes de dégazage suivantes sont couramment utilisées :

(1) Dégazage à l'hélium : Cette méthode utilise le fait que l'hélium a une solubilité plus faible dans les liquides que l'air ; un balayage continu à l'hélium donne de bons résultats mais est coûteux ;

(2) Chauffage et reflux : Cette méthode est efficace mais implique des opérations complexes et présente un risque de contamination par des vapeurs toxiques ;

(3) Dégazage sous vide : Cette méthode tend à éliminer la phase organique ;

(4) Dégazage par ultrasons : La phase mobile est placée dans un récipient à ultrasons et agitée avec des ondes ultrasonores pendant 10 à 15 minutes ; bien que cette méthode soit moins efficace, elle est simple à mettre en œuvre. En pratique, la méthode de dégazage par ultrasons reste largement utilisée en raison de sa simplicité. Bien que cette méthode puisse parfois entraîner une augmentation de la solubilité des gaz, elle répond généralement aux exigences des opérations analytiques courantes.