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क्रोमैटोग्राफी नमूना शीशियों की सफाई और रखरखाव के लिए सुझाव
बना गयी 09.18
**लेखक: इंटरनेट से मूल
क्रोमैटोग्राफी नमूना शीशियाँ उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (HPLC) और गैस क्रोमैटोग्राफी (GC) जैसी तकनीकों में विश्लेषण के लिए नमूने रखने में उपयोग की जाने वाली आवश्यक उपभोग्य वस्तुएँ हैं। इनकी स्वच्छता सीधे क्रोमैटोग्राफिक बेसलाइन की स्थिरता, पीक गुणवत्ता और परीक्षण परिणामों की सटीकता को प्रभावित करती है। यदि शीशियों के अंदर संदूषक या अशुद्धियाँ रह जाती हैं, तो यह आसानी से भूत-पीक और बेसलाइन विचलन जैसी समस्याओं को जन्म दे सकता है; इसलिए, क्रोमैटोग्राफी नमूना शीशियों की उचित सफाई और रखरखाव अत्यंत महत्वपूर्ण है।
I. सफाई से पहले की तैयारियाँ
छँटाई और वर्गीकरण
नमूना शीशियों को सामग्री (काँच, पॉलीप्रोपाइलीन) और आकार (1.5 mL, 2 mL, आदि) के अनुसार अलग करें ताकि विभिन्न सामग्रियों को एक साथ धोने से होने वाली खरोंच या विकृति से बचा जा सके।
किसी भी टूटी, चटकी हुई या विकृत किनारों वाली नमूना शीशियों को हटा दें, और उन्हें तुरंत नष्ट कर दें ताकि खराब सीलिंग या अवशिष्ट संदूषण से बचा जा सके जिसे हटाना मुश्किल होता है।
उपभोग्य वस्तुओं का विघटन
नमूना शीशियों को उनके ढक्कन और सेप्टा से पूरी तरह अलग करें। यह अनुशंसित है कि सेप्टा को अलग से धोया जाए या सीधे बदल दिया जाए (कई बार उपयोग किए गए सेप्टा में उम्र बढ़ने और अशुद्धियों को अवशोषित करने की प्रवृत्ति होती है)।
यदि शीशी के अंदर उच्च सांद्रता वाले नमूना अवशेष या खराब घुलनशील पदार्थ हैं, तो पहले अपशिष्ट तरल को बाहर निकालें और शीशी को शुद्ध पानी से प्रारंभिक रूप से धोएं।
II. विभिन्न स्तरों के संदूषण के लिए सफाई के तरीके
1. हल्के संदूषण के लिए नियमित सफाई (जल-घुलनशील नमूना अवशेषों के लिए उपयुक्त)
नियमित परीक्षण में उपयोग किए जाने वाले सामान्य नमूनों के लिए उपयुक्त (जैसे कार्बनिक अम्ल, शर्करा, अकार्बनिक लवण विलयन)। प्रक्रिया इस प्रकार है:
नमूना शीशी को उसके आयतन के तीन-चौथाई तक शुद्ध जल से भरें, 5–10 मिनट तक अल्ट्रासोनिकेट करें, हिलाएं, फिर अपशिष्ट द्रव को बहा दें।
उपरोक्त प्रक्रिया 2–3 बार दोहराएं जब तक कि निकला हुआ जल साफ और दृश्य अशुद्धियों से मुक्त न हो जाए।
अंत में, जल-घुलनशील अशुद्धियों के अतिरिक्त सूक्ष्म कार्बनिक अवशेषों को हटाने के लिए आंतरिक दीवारों को क्रोमैटोग्राफिक-ग्रेड मेथनॉल या एसीटोनिट्राइल से 2–3 बार धोएं।
नमूना शीशी को धूल-मुक्त फिल्टर पेपर पर उलटा रखें और इसे फ्यूम हुड में प्राकृतिक रूप से हवा में सूखने दें।
2. मध्यम संदूषण (कार्बनिक नमूनों और चिकनी अवशेषों के लिए उपयुक्त)
कार्बनिक विलायक, वसा, प्रोटीन और अन्य पानी में कम घुलनशील पदार्थों वाले नमूनों में अवशेषों के लिए उपयुक्त। प्रक्रिया इस प्रकार है:
सबसे पहले, नमूना शीशी को निर्जल इथेनॉल या एसीटोन में 30 मिनट तक भिगोएँ ताकि कार्बनिक अवशेष नरम हो जाएँ।
भिगोने का घोल फेंक दें, उचित मात्रा में जलीय तटस्थ डिटर्जेंट घोल (जैसे 5% बर्तन धोने का तरल घोल) डालें, और 15–20 मिनट तक सोनिकेट करें।
बोतल की भीतरी दीवारों को शुद्ध पानी से बार-बार धोएं जब तक कि कोई झाग न बचे, यह सुनिश्चित करते हुए कि सभी डिटर्जेंट अवशेष पूरी तरह से हटा दिए गए हैं।
क्रोमैटोग्राफिक-ग्रेड मेथनॉल से दो बार धोएँ, फिर बोतलों को उल्टा करके हवा में सुखाएँ या उन्हें 40–60 °C के निम्न तापमान पर ओवन में सुखाने के लिए रखें (उच्च तापमान के कारण काँच की बोतलों के टूटने से बचाने के लिए)।
3. गंभीर संदूषण (मजबूत अधिशोषण करने वाले, कठिनाई से अपघटित होने वाले नमूना अवशेषों पर लागू)
कीटनाशक अवशेष, एंटीबायोटिक्स और उच्च सांद्रता वाले बफर लवण जैसे जिद्दी अवशेषों के लिए उपयुक्त। प्रक्रिया इस प्रकार है:
एक विशेष सफाई घोल तैयार करें: संदूषक के प्रकार के अनुसार चयन करें; उदाहरण के लिए, क्षारीय संदूषकों को 5% तनु नाइट्रिक अम्ल में भिगोएँ; जिद्दी कार्बनिक अवशेषों को 10% मेथनॉल–हाइड्रोक्लोरिक अम्ल मिश्रण में भिगोएँ।
नमूना शीशियों को सफाई घोल में पूरी तरह डुबोएँ और 2–4 घंटे तक भिगोने के लिए छोड़ दें (या 10 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक सफाई करें)। तेज़ अम्ल या क्षार और पॉलीप्रोपाइलीन नमूना शीशियों के बीच लंबे समय तक संपर्क से बचें।
नमूना शीशियों को निकालें और शुद्ध जल से बार-बार धोएं जब तक कि घोल तटस्थ न हो जाए (pH परीक्षण पट्टियों से जांचें) ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि सफाई घोल का कोई अवशेष न बचा हो।
क्रोमैटोग्राफिक-ग्रेड एथेनॉल और मेथनॉल से क्रमिक रूप से धोएं, फिर सुखाएं और बाद में उपयोग के लिए अलग रख दें।
नोट: तेज अम्ल या क्षार से सफाई के बाद, अच्छी तरह से धोना आवश्यक है; अन्यथा, शेष अम्ल या क्षार क्रोमैटोग्राफिक कॉलम को संक्षारित कर सकते हैं या विश्लेषण के दौरान pH स्थितियों को प्रभावित कर सकते हैं।
III. सफाई के बाद सुखाना और भंडारण
सुखाने की विधि का चयन
वायु सुखाना: कांच की नमूना शीशियों के लिए उपयुक्त; धूल को अंदर जमने से रोकने के लिए उन्हें धूल-मुक्त वातावरण में उल्टा रखें। इस विधि में अधिक समय लगता है लेकिन शीशियों के खराब होने की संभावना कम होती है।
ओवन में सुखाना: तापमान ≤60°C बनाए रखें। सुनिश्चित करें कि बोतलों के अंदर की अधिकांश नमी पहले ही निकाल दी गई हो ताकि अचानक उच्च ताप के संपर्क में आने से कांच फटने से बचा जा सके; पॉलीप्रोपाइलीन नमूना बोतलों के लिए ओवन में सुखाने की सिफारिश नहीं की जाती है ताकि विकृति से बचा जा सके।
नाइट्रोजन ब्लो-ड्राइंग: तत्काल स्थितियों के लिए उपयुक्त; उच्च शुद्धता वाले नाइट्रोजन से बोतलों के आंतरिक भाग को तेजी से शुद्ध करें। यह विधि कुशल है और द्वितीयक संदूषण को रोकती है।
भंडारण युक्तियाँ
साफ और सूखे होने के बाद, नमूना शीशियों को धूल और प्रयोगशाला एरोसोल से संदूषण रोकने के लिए एक साफ, ढक्कन वाले भंडारण बॉक्स में रखा जाना चाहिए।
शीशी के ढक्कन और नए सेप्टा को अलग-अलग सीलबंद कंटेनरों में संग्रहित किया जाना चाहिए और उपयोग से ठीक पहले ही जोड़ा जाना चाहिए ताकि सेप्टा अशुद्धियों को अवशोषित न करें।
विभिन्न बैचों में साफ की गई नमूना शीशियों को अलग-अलग संग्रहित किया जाना चाहिए और स्पष्ट रूप से लेबल किया जाना चाहिए; पहले साफ किए गए बैच का उपयोग करने को प्राथमिकता दी जानी चाहिए।
IV. नियमित रखरखाव के लिए सावधानियाँ
क्रॉस-संदूषण से बचें
विभिन्न प्रकार के नमूनों के लिए अलग-अलग नमूना शीशियों का उपयोग करें; उदाहरण के लिए, कीटनाशक अवशेष परीक्षण के लिए उपयोग की जाने वाली नमूना शीशियों को खाद्य पोषण विश्लेषण के लिए उपयोग की जाने वाली शीशियों के साथ नहीं मिलाया जाना चाहिए।
सफाई उपकरण (अल्ट्रासोनिक सफाई टैंक, चिमटी, बीकर) को नियमित रूप से साफ किया जाना चाहिए ताकि उपकरण द्वारा लाए गए अशुद्धियाँ नमूना शीशियों को दूषित न करें।
सीलिंग रिंग और कैप का रखरखाव
सिलिकॉन सीलिंग रिंग केवल एक बार उपयोग के लिए अनुशंसित हैं; बार-बार छेदने के बाद, वे फटने और कण गिराने के लिए प्रवण होती हैं, जो नमूने को दूषित कर सकती हैं या इंजेक्शन सुई को अवरुद्ध कर सकती हैं।
यदि स्क्रू कैप खराब हो जाएँ या ठीक से सील न करें, तो नमूने के वाष्पीकरण या बाहरी संदूषकों के प्रवेश को रोकने के लिए उन्हें तुरंत बदल दिया जाना चाहिए।
नियमित यादृच्छिक जाँच
सफाई के बाद, नमूना शीशियों का एक यादृच्छिक चयन लिया जाना चाहिए, उन्हें रिक्त विलायक (जैसे मोबाइल फेज़) से भरा जाना चाहिए, और बेसलाइन की जाँच के लिए विश्लेषण किया जाना चाहिए। यदि कोई असामान्य शिखर पाए जाते हैं, तो शीशियों को फिर से साफ किया जाना चाहिए।
V. सफाई दिशानिर्देश
क्रोमैटोग्राफी नमूना शीशियों की आंतरिक दीवारों को साफ करने के लिए कठोर बालों वाले ब्रश या स्टील वूल का उपयोग न करें, क्योंकि इससे खरोंचें आ सकती हैं; संदूषक इन खरोंचों में रह सकते हैं और पूरी तरह से हटाना मुश्किल हो सकता है।
पॉलीप्रोपाइलीन नमूना शीशियों को उच्च तापमान (>60 °C) या मजबूत ऑक्सीकरण एजेंटों के संपर्क में नहीं लाया जाना चाहिए, ताकि सामग्री के विरूपण या वृद्धावस्था को रोका जा सके।
साइनाइड या पारा जैसे अत्यधिक विषैले पदार्थों वाली नमूना शीशियों को साफ करने से पहले खतरनाक अपशिष्ट निपटान नियमों के अनुसार हानिरहित उपचार से गुजरना चाहिए।
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