Quali fattori influenzano la capacità di carico del campione di quella colonna cromatografica?

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La capacità di caricamento del campione di una colonna cromatografica si riferisce generalmente a quella di una colonna preparativa. Quali fattori influenzano la capacità di caricamento del campione di una colonna cromatografica? Quali diversi esiti potrebbero derivare da variazioni nella capacità di caricamento del campione?

① Maggiore è la dimensione dei pori del materiale di riempimento, minore è la sua area superficiale specifica, con conseguente minor numero di fasi stazionarie legate, minor numero di siti di adsorbimento per il campione e, di conseguenza, una minore capacità di caricamento del campione;

② Maggiore è la densità di legame, maggiori sono i siti di adsorbimento disponibili, con conseguente maggiore capacità di caricamento del campione;

③ I materiali di riempimento completamente porosi presentano una maggiore capacità di caricamento del campione rispetto ai materiali di riempimento core-shell (poiché il nucleo solido dei materiali core-shell occupa una porzione dell'area superficiale specifica).

Nota: Questo non è direttamente correlato al contenuto di carbonio. Ad esempio, C18 ha un contenuto di carbonio più elevato rispetto a C8, ma ciò indica semplicemente una catena di carbonio più lunga e una maggiore idrofobicità. Il numero di siti di adsorbimento o la densità di legame potrebbero non seguire necessariamente questo andamento.

Per fasi legate identiche, come entrambe siano fasi legate C18, un contenuto di carbonio più elevato correla positivamente con la densità di legame e la capacità di caricamento del campione.

Maggiore sono le dimensioni della colonna, maggiore è la quantità di materiale di imballaggio e maggiore è la capacità di carico del campione.

① Minore è la dimensione delle particelle del riempitivo, maggiore è l'efficienza della colonna, maggiore è la risoluzione e maggiore è la capacità di caricamento del campione;

② Maggiore è la lunghezza della colonna, maggiore è l'efficienza della colonna, maggiore è la risoluzione e maggiore è la capacità di caricamento del campione.

Dove le impurità presentano bassa risoluzione e alto contenuto, interferiscono con la separazione del composto target, influenzando significativamente la capacità di caricamento del campione della colonna.