**인터넷에서 수집된 정보
크로마토그래피 컬럼의 수명은 비용과 직접적으로 관련되어 있기 때문에 상당한 관심사입니다. 컬럼의 서비스 수명에 영향을 미치는 요인은 무엇입니까? 수명을 연장하는 방법이 있습니까?
가능한 기여 요인
① 크로마토그래피 조건이 상대적으로 극단적임
② 컬럼의 내성이 좋지 않음
③ 샘플이 상대적으로 오염됨
④ 보호 조치가 취해지지 않음
1. 크로마토그래피 조건이 상대적으로 극단적임
크로마토그래피 조건이 극단적인 경우는 다음과 같습니다:
① 이동상의 pH가 지나치게 극단적입니다.
② 이동상에서 완충 염 농도가 지나치게 높습니다;
③ 컬럼 압력이 지나치게 높습니다;
④ 컬럼 온도가 지나치게 높습니다.
1. 표준 실리카 기반 컬럼은 일반적으로 pH 2에서 6 사이의 값을 허용합니다. pH 2 미만에서는 결합상이 가수분해되어 분리될 수 있으며, pH 7 초과에서는 실리카 충진제가 용해되어 유출될 수 있습니다.
해결책: 극단적인 pH 요구 사항의 경우, 넓은 pH 허용 범위를 가진 유기 하이브리드 컬럼을 사용하십시오.
2. 이동상 내 과도하게 높은 완충염 농도:
① 완충염 내 기계적 불순물도 증가할 수 있습니다. 완충염의 멤브레인 여과가 필요합니다.
② 높은 완충액 염 농도에서 구배의 유기상 비율이 과도하면 염 침전이 발생하여 믹서, 주입기, 컬럼 및 튜빙이 막힐 수 있습니다.
해결책: 유기상 비율이 과도하지 않도록 하거나 유기상에 물 20%를 첨가하십시오.
3. 높은 이동상 점도로 인한 높은 컬럼 압력:
고점도 용매: 예) 이소프로판올, 에탄올, 디옥산, 메탄올-물 혼합물
해결책: 1) 점도가 낮은 이동상으로 변경; 2) 유속 감소; 3) 컬럼 온도를 적절히 높임;
4. 제조업체는 일반적으로 컬럼 온도를 50°C 미만으로 유지할 것을 권장합니다. 과도한 열은 컬럼 수명을 단축시킬 수 있기 때문입니다.
해결책: 향상된 내열성을 위해 유기 하이브리드 컬럼을 사용하십시오.
2. 컬럼 내성 문제
1. 앞서 언급했듯이 유기 하이브리드 컬럼은 환경 pH 및 온도 변화에 대한 내성이 우수합니다.
2. 치아의 열구와 유사한 실리카 매트릭스 내의 미세 다공성 구조는 시료 보유 또는 비활성 흡착을 쉽게 유발합니다.
해결책: 미세 다공성을 최소화하는 특수 기술을 사용하면 컬럼 수명을 크게 연장할 수 있습니다.
3. 더 작은 입자 크기의 컬럼은 컬럼 압력이 높아지기 쉽습니다.
해결책: 고효율 코어-쉘 컬럼을 사용하십시오. 더 큰 입자 크기의 코어-쉘 컬럼은 효율성 감소가 최소화되면서 오염으로 인한 압력 증가에 대한 내성이 더 큽니다.
3. 시료가 오염되었습니다.
샘플의 출처를 이해해야 합니다—자연 제품 추출물인지, 생물학적 샘플인지, 발효 제품인지, 또는 합성 화합물인지. 자연 제품 추출물의 경우, 우리의 준비 작업은 오염 물질인 색소를 제거하면서 그 특성에 따라 목표 화합물을 농축하는 것입니다. 생물학적 샘플의 경우—조직, 혈액 등에서 유래할 수 있습니다.
발효 제품의 경우, 발효액의 당과 파괴된 미생물 세포의 성분과 같은 영양소를 제거해야 하며, 동시에 저농도 표적 성분을 농축해야 합니다. 합성 제품의 경우, 반응 용액에 남아 있는 잔류 성분, 부산물 및 과잉 원료를 식별하고, 컬럼을 오염시키는 성분을 적절히 제거해야 합니다.
해결책: ① 불순물 제거 또는 농축을 위해 용매 추출 또는 침전 방법을 사용합니다; ② 소량 샘플의 경우, 샘플 준비를 위해 고체상 추출(SPE)을 이용합니다; ③ 대량 샘플의 경우, 불순물을 흡착하거나 목표 화합물을 농축하기 위해 대형 컬럼을 사용합니다.
4.컬럼 전면 보호
컬럼 오염원: ① 시료에서 유래; ② 이동상에서 유래.
해결책: 1) 이동상 내 오염 물질이 컬럼으로 유입되는 것을 방지하기 위해 인젝터 상류에 온라인 필터를 설치하십시오.
2) 주 컬럼 상류에 가드 컬럼을 설치하여 시료 내 강하게 보유되는 물질과 같은 오염 물질이 컬럼으로 유입되는 것을 방지하고, 이동상 내 오염 물질에 대한 2차 보호 기능도 제공하십시오.