Escolhendo a fase aquosa para experimentos de cromatografia: água deionizada ou água ultrapura?

**Autor: Original da Internet

Experimentos de cromatografia, particularmente análises de precisão como cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e cromatografia iônica (CI), impõem requisitos quase rigorosos à pureza da água utilizada. O uso de água inadequada pode levar a uma série de problemas, incluindo desvio da linha de base, picos fantasmas, desgaste na haste do pistão, entupimento da coluna e redução da sensibilidade, que afetam diretamente a precisão e a confiabilidade dos dados.

De acordo com a norma nacional GB/T 6682 (Norma Chinesa), a água de grau laboratorial é classificada em três graus: Água Grau 1 / Água Grau 2 / Água Grau 3. A água Grau 1 é o 'ponto de entrada' para cromatografia.

O processo central é a destilação. A água é aquecida para vaporizar, depois condensada e coletada; em teoria, isso remove a maioria dos sais não voláteis, partículas e microrganismos. De acordo com a documentação da Watsons, o processo envolve destilação a uma alta temperatura de 105°C seguida de filtração multiestágio.

① Eficaz na remoção de sais inorgânicos e íons de dureza.

② Adequado para aplicações gerais de laboratório com baixos requisitos.

③ Facilmente disponível no mercado e de baixo custo.

① Compostos orgânicos voláteis, amônia, CO₂ e certas impurezas de baixo ponto de ebulição podem ser transportados com o vapor.

② CO₂, plastificantes, microrganismos, etc., podem ser introduzidos durante a embalagem, armazenamento e após a abertura.

③ Falta CoA de grau laboratorial; TOC, endotoxinas, nucleases e níveis de fundo de metais não são garantidos.

O processo principal geralmente envolve filtração multiestágio + osmose reversa RO + desinfecção. Os dados indicam que ele emprega filtração profunda multicamadas, adsorção por carvão ativado, purificação profunda por osmose reversa RO, osmose reversa secundária e esterilização por ozônio, entre outros métodos.

① Baixa condutividade elétrica; alguns lotes podem se aproximar da faixa de água de Grau 3 de laboratório ou até mesmo Grau 2.

② Baixo custo e fácil disponibilidade.

③ Em muitos laboratórios em todo o país, há de fato uma tradição de usá-la como uma 'água substituta temporária'.

① Atende aos padrões de água para alimentos e bebidas, não aos padrões de reagentes de laboratório; ② Lote, origem, embalagem e duração do armazenamento podem afetar a qualidade da água; ③ Baixa condutividade não garante conformidade com os limites de COT, microbianos, endotoxinas, íons metálicos ou sílica.

O processo central envolve troca iônica. Resinas de troca catiônica e aniônica são usadas para remover íons como Na⁺, Ca²⁺, Mg²⁺, Cl⁻ e SO₄²⁻ da água.

Sistemas EDI (eletrodeionização) ou de leito misto também podem ser empregados para aumentar ainda mais a resistividade. A água deionizada reduz efetivamente a condutividade, mas não consegue remover completamente compostos orgânicos não iônicos, microrganismos, partículas ou endotoxinas.

O cerne reside em uma combinação de múltiplas tecnologias. Um processo típico envolve: pré-tratamento → RO → EDI/leito misto → oxidação UV → ultrafiltração/filtração final de 0,22 μm → monitoramento online de resistividade/TOC. As especificações de qualidade para água ultrapura incluem parâmetros como 18,2 MΩ·cm, TOC <5 ppb, bactérias <10 UFC/mL e níveis de endotoxina indetectáveis ou extremamente baixos.

1. Enxágue inicial ou intermediário de vidraria;

2. Reposição de banhos-maria, limpadores ultrassônicos e certos sistemas de circulação de refrigeração;

3. Experimentos gerais de ensino e experimentos qualitativos;

4. Preparação de reagentes padrão que não são sensíveis ao fundo iônico;

5. Substituto temporário de emergência para água de Grau 3.

1. HPLC / LC-MS;

2. ICP-MS / ICP-OES / AAS análise de traços de metais;

3.TOC, cromatografia iônica, análise de cátions e ânions ultratraço;

4.PCR, qPCR, experimentos de RNA, cultura de células;

5.Semicondutores, fotolitografia, limpeza de precisão;

6. Preparação de soluções padrão, reagentes de referência e soluções de calibração.

A resistividade reflete apenas impurezas iônicas; não indica conformidade com os padrões para matéria orgânica, microrganismos, endotoxinas, sílica, partículas ou níveis de fundo de metais.

Mesmo que a água ultrapura atinja uma resistividade de 18,2 MΩ·cm, ela absorverá rapidamente CO₂ ao ser exposta ao ar, fazendo com que a resistividade caia; portanto, é melhor prepará-la e usá-la imediatamente.