Como os frascos de fase móvel podem atender aos requisitos das operações analíticas de rotina?

**Autor: Original da Internet

O frasco de solvente é o ponto de partida para a fase móvel e é tipicamente usado para conter uma solução aquosa ou uma solução orgânica.

Para soluções aquosas, a principal preocupação é prevenir a contaminação. Embora a água usada em cromatografia líquida seja geralmente esterilizada, as bactérias são altamente resilientes; sob condições adequadas de temperatura e luz, elas se tornam ativas, e a adição de aditivos como fosfatos à fase móvel acelera ainda mais seu crescimento. Portanto, uma tarefa crucial em relação aos frascos de solvente é substituir a fase móvel com frequência para garantir que ela permaneça fresca.

Com soluções de fase orgânica, não há necessidade de se preocupar com o crescimento bacteriano. No entanto, as fases orgânicas são propensas à polimerização; a acetonitrila, em particular, polimeriza muito facilmente sob condições de luz adequadas, resultando na formação de precipitados polimerizados floculentos no frasco. Para evitar a polimerização, use frascos de solvente âmbar ao armazenar acetonitrila para evitar a luz solar direta e descarte qualquer solução residual no fundo do frasco ao substituí-lo.

A cabeça do filtro no frasco de solvente serve para evitar que impurezas particuladas entrem no sistema de fluxo do instrumento. Geralmente é feita de vidro de quartzo sinterizado ou aço inoxidável. Se ficar bloqueada, causará fluxo deficiente da fase móvel; portanto, deve ser limpa. Cabeças de filtro de vidro são geralmente embebidas em ácido nítrico diluído, enquanto as de aço inoxidável podem ser limpas diretamente por ultrassom.

O objetivo da desgaseificação é remover gases dissolvidos da fase móvel, garantindo a entrega precisa do fluido pela bomba cromatográfica e melhorando a reprodutibilidade dos tempos de retenção e das áreas dos picos; estabilizando a linha de base e aumentando a relação sinal-ruído; prevenindo o alargamento dos picos causado por bolhas, melhorando assim o desempenho do detector; e reduzindo o volume morto e prevenindo a oxidação do empacotamento, protegendo assim a coluna cromatográfica.

Atualmente, os seguintes quatro métodos de desgaseificação são comumente usados:

(1) Desgaseificação com hélio: Este método utiliza o fato de que o hélio tem menor solubilidade em líquidos do que o ar; a purga contínua com hélio produz bons resultados, mas é cara;

(2) Aquecimento e refluxo: Este método é eficaz, mas envolve operações complexas e apresenta risco de contaminação por vapores tóxicos;

(3) Desgaseificação a vácuo: Este método tende a remover a fase orgânica;

(4) Desgaseificação ultrassônica: A fase móvel é colocada em um recipiente ultrassônico e agitada com ondas ultrassônicas por 10–15 minutos; embora este método seja menos eficaz, é simples de operar. Na prática, o método de desgaseificação ultrassônica continua sendo amplamente utilizado devido à sua simplicidade. Embora este método possa ocasionalmente levar a um aumento na solubilidade do gás, geralmente atende aos requisitos das operações analíticas de rotina.