Làm thế nào để các lọ pha động đáp ứng được yêu cầu của các thao tác phân tích thông thường?

**Tác giả: Nguyên gốc từ Internet

Bình dung môi là điểm khởi đầu cho pha động và thường được sử dụng để chứa dung dịch nước hoặc dung dịch hữu cơ.

Đối với dung dịch nước, mối quan tâm chính là ngăn ngừa nhiễm bẩn. Mặc dù nước sử dụng trong sắc ký lỏng thường được khử trùng, vi khuẩn có sức sống rất mạnh; trong điều kiện nhiệt độ và ánh sáng phù hợp, chúng trở nên hoạt động, và việc thêm các chất phụ gia như phosphate vào pha động càng thúc đẩy sự phát triển của chúng. Do đó, một nhiệm vụ quan trọng đối với bình dung môi là thay pha động thường xuyên để đảm bảo nó luôn tươi mới.

Với các dung dịch pha hữu cơ, không cần lo lắng về sự phát triển của vi khuẩn. Tuy nhiên, pha hữu cơ dễ bị trùng hợp; đặc biệt là acetonitrile, rất dễ bị trùng hợp dưới điều kiện ánh sáng thích hợp, dẫn đến hình thành các kết tủa trùng hợp dạng bông trong chai. Để ngăn ngừa sự trùng hợp, hãy sử dụng chai dung môi màu nâu khi bảo quản acetonitrile để tránh ánh nắng trực tiếp, và loại bỏ bất kỳ dung dịch còn lại nào ở đáy chai khi thay thế.

Đầu lọc trong chai dung môi có tác dụng ngăn chặn các tạp chất dạng hạt xâm nhập vào hệ thống dòng chảy của thiết bị. Nó thường được làm bằng thủy tinh thạch anh thiêu kết hoặc thép không gỉ. Nếu bị tắc, nó sẽ gây ra dòng chảy kém của pha động; do đó, nó phải được làm sạch. Đầu lọc thủy tinh thường được ngâm trong axit nitric loãng, trong khi đầu lọc bằng thép không gỉ có thể được làm sạch trực tiếp bằng sóng siêu âm.

Mục đích của việc khử khí là loại bỏ các khí hòa tan trong pha động, đảm bảo việc phân phối chất lỏng chính xác của bơm sắc ký và cải thiện độ lặp lại của thời gian lưu và diện tích đỉnh; ổn định đường nền và tăng tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu; ngăn ngừa hiện tượng mở rộng đỉnh do bọt khí, từ đó nâng cao hiệu suất của detector; và giảm thể tích chết cũng như ngăn ngừa quá trình oxy hóa chất nhồi, nhờ đó bảo vệ cột sắc ký.

Hiện nay, bốn phương pháp khử khí sau đây thường được sử dụng:

(1) Khử khí bằng heli: Phương pháp này tận dụng thực tế là heli có độ hòa tan trong chất lỏng thấp hơn không khí; sục khí heli liên tục cho kết quả tốt nhưng tốn kém;

(2) Đun nóng và hồi lưu: Phương pháp này hiệu quả nhưng thao tác phức tạp và có nguy cơ nhiễm bẩn từ hơi độc;

(3) Khử khí chân không: Phương pháp này có xu hướng loại bỏ pha hữu cơ;

(4) Khử khí bằng siêu âm: Pha động được đặt trong bình siêu âm và khuấy bằng sóng siêu âm trong 10–15 phút; mặc dù phương pháp này kém hiệu quả hơn nhưng thao tác đơn giản. Trong thực tế, phương pháp khử khí bằng siêu âm vẫn được sử dụng rộng rãi do tính đơn giản của nó. Mặc dù phương pháp này đôi khi có thể dẫn đến tăng độ hòa tan của khí, nhưng nhìn chung nó đáp ứng các yêu cầu của các thao tác phân tích thông thường.